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      如何選擇ELISA試劑盒?關鍵檢測方法解析
      更新時間:2025-10-16瀏覽:312次

        如何選擇ELISA試劑盒?關鍵檢測方法解析

        選擇ELISA試劑盒需首先明確檢測目標(大分子蛋白或小分子抗原)及樣本類型,再根據檢測原理匹配方法:

        1. ?雙抗體夾心法?

        適用于二價及以上大分子抗原(如細胞因子、抗體),通過捕獲抗體和檢測抗體形成“夾心"結構,特異性高且靈敏度強?。但需確保抗原含多個表位,且需優化抗體對以避免交叉反應?。

        2. ?競爭法?

        針對小分子抗原,通過待測物與酶標抗原/抗體競爭結合位點,顯色信號與待測物濃度成反比?。優勢在于可檢測不純樣本,但敏感性和專一性較低?。

        3. ?間接法?

        通過酶標二抗放大信號,靈敏度高且經濟靈活,常用于抗體效價檢測?。但需注意二抗可能與非目標蛋白結合導致背景升高?。

        4. ?直接法?

        步驟簡單,適合快速檢測,但靈敏度低且需標記每種一抗,成本較高?。

        選擇建議

        大分子蛋白?:優先雙抗體夾心法?;

        小分子抗原?:選擇競爭法?;

        樣本復雜度?:高背景樣本需優化封閉和洗滌步驟?;

        靈敏度要求?:低豐度目標需高敏試劑盒(pg/mL級)?。

        注意事項

        驗證試劑盒的批間精密度(CV<15%)和加標回收率(80%~120%);

        特殊樣本(如高脂血清)需預處理或選擇適配試劑盒?。

        注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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