以下是關(guān)于人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒的實驗使用說明：

　　BS-1713 人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 天津本生

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)，通過HRP標(biāo)記的檢測抗體與樣本中AT2R結(jié)合，經(jīng)TMB顯色后測定吸光度(OD值)，顏色深淺與AT2R濃度呈正相關(guān)?。

　　二、試劑盒組成

　　酶標(biāo)包被板(48T/96T)

　　標(biāo)準(zhǔn)品(凍干粉，需用稀釋液重構(gòu))

　　檢測溶液A/B(HRP標(biāo)記物)

　　濃縮洗滌液(需30倍稀釋)

　　顯色液A/B(TMB溶液)

　　終止液?。

　　三、樣本處理

　　血清/血漿?：3000rpm離心10-30分鐘，避免溶血?;

　　組織勻漿?：加入生理鹽水搗碎后離心取上清?;

　　保存?：分裝凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融?。

　　四、操作步驟

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：將凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液重構(gòu)，梯度稀釋為7個濃度(如5000pg/mL至78pg/mL)?;

　　加樣?：每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育30分鐘?;

　　洗滌?：棄液后拍干，加洗滌液靜置30秒，重復(fù)5次?;

　　顯色?：加入顯色液A/B各50μL，避光反應(yīng)15分鐘?;

　　終止?：加入50μL終止液，立即450nm測OD值?。

　　五、注意事項

　　避免試劑接觸金屬器械或強(qiáng)氧化劑?;

　　顯色時間需嚴(yán)格控制，超過30分鐘可能導(dǎo)致背景升高?;

　　渾濁樣本需離心澄清后檢測?;

　　不同批次試劑組分不可混用?。

　　六、結(jié)果計算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過曲線方程計算樣本濃度?。

　　注：以上資料僅供參考，具體請產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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