人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒實驗使用說明書

　　以下是關(guān)于人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒實驗使用說明書的綜合信息整理：

　　1. 試劑盒基本信息?

　　BS-0222 人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒

　　名稱?：人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒

　　英文名稱?：Human Apoptosis Inducing Factor (AIF) ELISA Kit

　　實驗方法?：雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

　　檢測范圍?：0.15–10 ng/mL(可定制)

　　靈敏度?：0.06–0.064 ng/mL

　　種屬?：人特異性

　　樣本類型?：血清、血漿、組織勻漿及其他生物液體

　　2. 試劑盒組成?

　　預(yù)包被96孔板?：1塊(可拆卸)

　　標準品?：2管(凍干，需復(fù)溶)

　　檢測溶液A/B?：各120 μL(酶標抗體)

　　TMB底物?：9 mL

　　終止液?：6 mL(2M硫酸)

　　洗滌液?：20 mL(30×濃縮液，需稀釋)

　　說明書?：1份

　　3. 實驗流程(雙抗體夾心法)?

　　包被抗體?：

　　稀釋抗體至1–10 μg/mL，加入孔中0.1 mL，4℃過夜。

　　洗滌3次(洗滌緩沖液稀釋后使用)。

　　加樣與孵育?：

　　加入待測樣本0.05 mL，37℃孵育1小時。

　　洗滌后加入酶標抗體0.05 mL，37℃孵育0.5–1小時。

　　顯色與終止?：

　　加入TMB底物0.1 mL，37℃避光反應(yīng)10–30分鐘。

　　加入終止液0.05 mL，終止反應(yīng)。

　　結(jié)果判讀?：

　　肉眼觀察顏色深淺(陽性反應(yīng)為藍色，終止后變黃)。

　　酶標儀檢測450 nm OD值，陰性對照OD值的2.1倍以上為陽性。

　　4. 注意事項?

　　樣本處理?：

　　新鮮樣本檢測，避免細菌污染或反復(fù)凍融。

　　組織勻漿需充分混勻，避免氣泡。

　　試劑保存?：

　　未開封試劑：TMB底物、終止液4℃保存，其余-20℃。

　　開封后：酶標板需加干燥劑密封保存于-20℃。

　　重復(fù)性?：板內(nèi)/板間變異系數(shù)均<10%。

　　5. 典型數(shù)據(jù)參考?

　　標準曲線?(示例數(shù)據(jù))：

　　濃度 (ng/mL) 10 5 0.15 0

　　OD值 2.36 1.36 0.23 0.09

　　(具體數(shù)據(jù)需根據(jù)實驗建立標準曲線)

　　6. 其他說明?

　　適用范圍?：科研用途，不用于臨床診斷。

　　定制服務(wù)?：可調(diào)整檢測范圍、種屬或靈敏度。

　　注：以上資料僅供參考，如需詳細操作步驟或技術(shù)問題，建議參考產(chǎn)品附帶的說明或聯(lián)系供應(yīng)商。

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