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      犬白細胞分化抗原6(CD6)ELISA試劑盒實驗使用說明書
      發布時間:2025/8/21瀏覽:217次
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        犬白細胞分化抗原6(CD6)ELISA試劑盒實驗使用說明書

        一、實驗原理

        本試劑盒采用雙抗體夾心法檢測犬CD6抗原:

        包被抗體:微孔板預包抗CD6單克隆抗體,特異性捕獲樣本中的CD6抗原。

        生物素標記抗體:加入生物素標記的多克隆抗體,與已結合的CD6形成“夾心"結構。

        酶聯反應:通過HRP標記的鏈霉親和素與生物素結合,催化底物TMB顯色,吸光度(OD值)與CD6濃度成正比。

        二、試劑與材料

        試劑組分:

        預包被微孔板(96T/48T)

        CD6標準品(濃度梯度)

        生物素化抗體、HRP-鏈霉親和素

        TMB底物液、終止液、洗滌液(20×濃縮) 。

        儀器:酶標儀(450 nm)、微量移液器、恒溫箱(37℃)、離心機。

        三、操作步驟

        樣本處理:

        血清/血漿:室溫凝固后離心(2000×g,15分鐘),取上清。

        細胞培養上清:直接離心去除顆粒物。

        組織勻漿:加PBS勻漿后離心取上清。

        檢測流程:

        加樣:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育1小時。

        洗滌:棄液后,用洗滌液洗板3次,拍干。

        加酶標抗體:加入100μL生物素化抗體,37℃孵育30分鐘。

        顯色:加入TMB底物,避光反應15分鐘,終止液終止反應。

        結果計算:

        以標準品濃度(pg/mL)為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線,樣本濃度通過曲線方程計算。

        四、注意事項

        試劑保存:未開封試劑盒2-8℃保存,避免反復凍融;濃縮洗滌液需37℃溶解鹽結晶.

        干擾因素:避免樣本溶血、高濃度脂血或反復凍融.

        質量控制:每個樣本設復孔,標準品CV值應<10%.

        五、技術參數

        靈敏度:檢測限≤1.0 pg/mL。

        線性范圍:1.56–100 pg/mL .

        注:以上資料僅供參考,具體其他信息請咨詢技術老師或品牌供應商。

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