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      兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書
      發布時間:2025/9/2瀏覽:208次
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        兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗使用說明書

        BS-4142 兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒

        一、實驗原理

        本試劑盒采用雙抗體夾心法測定兔血清、血漿等樣本中TNF-α濃度。通過預包被TNF-α抗體的微孔板與樣本中抗原結合,再與HRP標記的二抗形成復合物,經TMB底物顯色后,通過450nm波長測定吸光度(OD值),標準曲線計算濃度。

        二、試劑盒組成

        組分規格(96T)儲存條件

        預包被微孔板1塊(96孔)4℃(短期)/-20℃(長期)

        標準品(TNF-α)1瓶(1.0mL)-20℃避光保存

        HRP標記抗體1瓶(8.0mL)4℃避光

        TMB底物液1瓶(6.0mL)4℃避光

        終止液1瓶(6.0mL)室溫

        三、實驗步驟

        樣本處理

        血清/血漿:4℃靜置2小時或過夜,1000×g離心20分鐘,取上清分裝保存(-20℃≤1個月,-80℃≤2個月)。

        避免溶血或反復凍融。

        檢測流程

        加樣:標準品梯度稀釋(1.37-1000pg/mL)及樣本各100μL/孔,37℃孵育90分鐘。

        洗滌:PBST洗滌3次,每次拍干。

        顯色:加入TMB底物避光反應15分鐘,終止液終止后30分鐘內測OD值。

        四、注意事項

        試劑使用前需平衡至室溫,不同批次不可混用。

        酶標儀預熱至450nm,建議雙孔復測以減少誤差。

        顯色液避免強光照射,終止后及時讀數。

        五、結果分析

        以標準品濃度(pg/mL)為橫坐標、OD值為縱坐標繪制標準曲線,樣本濃度通過曲線擬合值乘以稀釋倍數計算。

        六、儲存與有效期

        未開封試劑盒:按標簽溫度保存(-20℃或4℃),有效期12個月。

        已拆封微孔板:需干燥劑密封保存于-20℃,建議1個月內用完。

        注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據,具體產品說明請咨詢品牌供應商或技術老師。

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